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  • 山東康德萊凈化工程有限公司

    山東康德萊凈化更-核酸檢測實驗室PCR施工

    山東康德萊凈化工程有限公司

    • 主營產品:醫院ICU凈化,電子廠無塵車間,藥廠GMP車間凈化,手術室凈
    • 公司地址:山東濟南槐蔭區齊州路2066號善信大廈六樓603-604室
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    信息詳情

    1、實驗應在超凈工作臺或者生物安全柜內進行;


    2、實驗的過程中選擇尺寸的手套并能及時更換,在進出不同實驗區域或進行模板操作后都應更換實驗服、口罩、帽子及手套,以避免不同實驗區交叉污染;


    3、裝有PCR試劑的反應管在打開之前應先瞬時離心,將管壁及管蓋上的液體離至管底,降低污染手套或加樣器的風險;謹慎開啟反應管,防止管內液體濺出或形成氣溶膠導致污染;需要高溫加熱的樣本,可采用封口膜進行PCR管蓋密封,避免管蓋應受熱而發生彈開;


    4、吸加試劑和模板的操作應嚴格按照規范要求進行,遵守“慢吸快打”原則,盡量一次性完成,忌多次抽吸,以避免氣溶膠產生的交叉污染;


    5、PCR試劑建議小量分裝,以減少反復凍融、重復取樣次數和反復使用過程中的試劑污染;多樣本PCR反應時,先配制反應混合液分裝至反應管中,加入樣本核酸,請勿同時開蓋,盡量保證單人單管,實現完全閉管操作;




    6、實驗試劑應與樣品和PCR產物分開保存,不應放于同處;


    7、PCR擴增實驗完成后及時將反應管取出,用一次性手套或者塑封袋將產物反應管包裹丟棄,保證管蓋緊閉;


    8、實驗室自配試劑(去離子水、緩沖液等)和所有使用器具在使用之前均應高壓滅菌或紫外殺菌,尖、反應管等實驗耗材應一次性使用。









    根據實驗室的具體情況編寫質量體系文件,《質量手冊》、《程序文件》、《作業指導書》,并保證管理體系運行有效。


    管理體系的特點是應有明確的目的、規范的管理、有效的制約、的機制、能自我發展的整體。


    建立完善的SOP文件,對完成各項質量活動的方法作出規定,每個SOP都應對一個或一組相互關系的活動進行描述。


    每個SOP文件應說明該項質量各環節的輸入、轉換和輸出所需的文件、物資、人員、記錄以及它們與有關活動的接口關系。




    明確每個環節轉換過程中各項因素的要求,即由誰做、做什么、做到什么程序、達到什么要求,如何控制、形成什么記錄和報告,以及相應的審批手續。


    規定在質量活動中需要注意的例外或特殊情況的糾正措施。SOP應簡練、明確和易懂并且工作人員熟練掌握和嚴格遵守。

    需要注意以下問題:


    實驗室使用的基因擴增儀,熒光定量PCR儀都是高精度儀器。一旦儀器出現一些溫度或者檢測上的小偏差,則很可能對實驗結果產生較大的影響。因此,學會日常保養和維護是尤為重要的。


    1、儀器安置


    儀器應安放在濕度較低、灰塵較少并遠離水源和熱源的地方,無腐蝕性氣體或強磁場干擾。


    環境溫度建議在18~35℃之間。儀器之間應保持50cm 以上距離,降低儀器之間的影響。


    2、樣品臺、熱蓋定期清潔


    用95%乙醇配合棉簽、無塵布等工具,清潔樣品臺。之后運行PCR儀,設定保持溫度為50℃,約5~10min,讓殘余液體揮發去除。另外,熱蓋也應該用酒精或純水定期清洗,確保熱蓋清潔,溫控性能良好。對于熒光定量PCR,清潔樣品臺和熱蓋的同時,去除灰塵等雜物,保證光路清潔,降低信號干擾。


    3. 使用前預熱


    老款的PCR儀的性能比不上新款儀器,使用前需要進行預熱,不僅對儀器維護有好處,還能節約實驗時間。新款的儀器升溫快,但還是建議能在進行實驗前預熱2min,這樣可以有效延長儀器的使用壽命。


    4. 定期運行維護


    1.PCR儀器需要定期檢測,視制冷方式而定一般半年至少一次。


    2.PCR反應的要求溫度與實際分布的反應溫度是不一致的,當檢測發現各孔平均溫度差偏離設置溫度大于1~2℃時,可以運用溫度修正法糾正PCR實際反應溫度差。




    3.PCR反應過程的關鍵是升、降溫過程的時間控制,要求越短越好,當PCR儀的降溫過程超過60s,就應該檢查儀器的制冷系統,對風冷制冷的PCR儀要較地清理反應底座的灰塵;對其他制冷系統應檢查相關的制冷部件。


    4.一般情況如能采用溫度修正法糾正儀器的溫度時,不要輕易打開或調整儀器的電子控制部件,必要時要請人員修理或利用儀器電子線路詳細圖紙進行維修。

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